本发明提供一种正电荷型多糖类衍生物手性固定相的制备方法及用于碱性手性化合物的分离。具体步骤为：于盛有有机溶剂的反应容器中，多糖与多糖衍生化试剂及含仲胺、叔胺或季胺等基团的化学试剂反应，用甲醇充分洗涤固体物并干燥，备用；将上述含正电荷基团的多糖类衍生物涂敷于常用的色谱基质如硅胶上，干燥后即可制得正电荷型多糖类衍生物手性固定相。本发明的优点为制备简单、快速、重复性好，同时可根据需要选用不同的衍生化试剂，制备出具有不同手性识别能力的正电荷型手性固定相。本发明所制备的正电荷型多糖类衍生物手性固定相主要用于碱性手性化合物的分离，可在中性及酸性流动相条件下实现碱性手性化合物的快速分离。

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